食品微生物學小型化檢測分析光學顯微鏡
小型化檢測儀器和檢測工具的發展
在食品微生物學中,對正常菌群、腐敗組織、食源性病原菌、發酵
劑等進行的微生物學檢測鑒定是應用微生物學的重要組成部分。傳統
檢測方法有一百多年的歷史,即采用大量培養基(10m或是更多)來研究
細菌的某一特性(例如,采用乳糖肉湯來培養大腸桿菌并進行乳糖發酵
實驗)。將待測微生物接種到試管中很麻煩,因為一次只能接管。很多
微生物學家設計了合適的容器和更小的試管來進行這些實驗,以減少培
養基的使用量。該作者系統地開發了許多適用于微孔板的簡化方法來
減少試劑和培養基的使用量(從5~10mL減少到約0.2m),該微孔板有96個
孔,按8×12的格局排列。該系統的基本組件包括經過商業滅菌的微孔
板(用來盛放待測培養物)、批量接種設備、用來盛放固體培養基的容
器(大 Petri盤),以及液體培養基(盛放于另一種微孔板中,每孔可裝0.
2mL液體培養基)。
把待測液體培養物(純培養物)導入無菌微孔板的孔中以制成樣板(
每孔0.2m)。微孔板最多可容納96個不同的培養物,或48對相同培養物
或期望的多種組合。采用無菌多頭接種器(從同一板上伸出的96個吸頭
)將這些培養物轉移到固體或液體培養基中。接種器采用酒精火焰滅菌
,每一次轉移相當于傳統方祛的96次獨立接種。經合適的溫度培養后,
固體或液體培養基中培養物的生長情況能被觀察并記錄下來,對所得數
據可以進行分析。這些方法適合于研究大量的獨立菌落,或對待測樣品
中大量微生物進行研究。該作者采用此小型化系統從肉類和其他食品
中鑒定出數以千計的細菌,研究了有機染料對酵母和細菌的影響,對多
種組分中的微生物進行了具有挑戰性的研究并取得了很好的結果。這
些系統中的大多數最初用于腸道菌檢測(如沙門菌屬、志賀菌屬、變形
桿菌屬、腸桿菌屬等)。后來,許多公司擴大了檢測系統的檢測范圍,以
便鑒定非發酵菌、厭氧菌、革蘭陽性菌,甚至酵母和霉菌。起初,需要
一名分析人員來讀出每個小孔中反應的顏色,然后對照人為制定的編碼
來識別微生物。
在許多實驗室,自動稀釋儀已廣泛地應用于快速、準確的樣品稀釋,
液體轉移到微孔板已實現自動化;②普遍使用的微管自動讀數器能有效
地讀出微管中液體的混濁度、顏色以及熒光性來計算MPN值;③一流的
數學模型,計算機解析和結果打印輸